临床检验基础
1、血清与血浆的差别:血清缺少某些凝血因子,如凝血因子Ⅰ(纤维蛋白原)、Ⅱ(凝血酶原)、Ⅴ、Ⅷ等。
2、(除第三因子)血浆除钙离子外(如枸橼酸钠抗凝),含有其他全部凝血因子,适用于血栓和止血检验。
3、正常人血量约为(70±10)ml/kg体重,成人约4~5L,约占体重的6%~8%,其中血浆占55%,血细胞占45%。女性妊娠期间血量可增加23%~25%。
血液的主要生理功能包括:运输、协调、防御、维持机体内环境稳定等功能
4、严重一氧化碳中*或氰化物中*者血液呈樱红色。
5、酸碱度:正常人血液pH值7.35~7.45,动脉血pH值7.40,静脉血pH值7.35。
6、血浆渗透量:正常人约为~mOsm/(kg?H20)。
7、红细胞均匀混悬状态,与红细胞膜表面的唾液酸根、正常血浆成分、血浆黏度及血流动力学等因素有关。
全血黏度约为生理盐水黏度的4~5倍,血浆黏度约为生理盐水黏度的1.6倍。
血液黏度与血细胞比容和血浆黏度有关(受血浆中纤维蛋白原、球蛋白等大分子蛋白质的影响,它们的浓度越高,血浆黏度越高)。
血液生理功能:运输、协调、维护机体内环境稳定、防御功能。
婴幼儿采血:大拇指或足跟内外侧缘;严重烧伤患者:皮肤完整处。
8、乙二胺四乙酸、枸橼酸盐:能与血液中钙离子结合成螯合物,使Ca2+失去凝血作用,阻止血液凝固。
9、肝素:加强抗凝血酶(AT)灭活丝氨酸蛋白酶作用,阻止凝血酶的形成,并阻止血小板聚集等作用,从而阻止血液凝固。
10、血涂片制备:制备涂片时,血滴愈大、角度愈大、推片速度愈快,血膜愈厚,反之则愈薄。血细胞比容增高、血液黏度较高时,应采用小血滴、小角度、慢推;
血细胞比容减低、血液较稀时,应采用大血滴、大角度、快推。
11、血液细胞染色深浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、pH值密切相关。
瑞氏染色:酸性伊红(E-)+碱性亚甲蓝(M+)。甲醇的作用:溶解美蓝和伊红;固定细胞形态。(物理吸附+化学亲和)。血红蛋白、嗜酸性颗粒=碱性蛋白质=嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质=酸性蛋白质=嗜碱性物质。中性颗粒=嗜中性物质;原红、早幼红胞质、核仁含较多酸性物质,染成较浓厚的蓝色;中幼红既含酸性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色(多色性),复染时应先加缓冲液,后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡,也可用甲醇脱色。
瑞氏:细胞质成分、中性颗粒;吉姆萨:细胞核、寄生虫(如疟原虫等)
瑞氏染料的质量规格评价:吸光度比值(rA),1.3±0.1时染料即可使用。新鲜配制的染料偏碱,贮存(室温或是37℃,必须加塞,防甲醇挥发(如加甘油)和氧化成甲酸)时间愈久,染色效果愈好。所用甲醇须为AR级,若其中含过多丙酮,会使染色偏酸,白细胞着色不良。
12、血红蛋白分子是有核红细胞、网织红细胞内形成的一种含色素蛋白质。色素部分为亚铁血红素(原卟啉、铁),蛋白质部分为珠蛋白(肽链分为α(个氨基酸)、β(个氨基酸))。
每个Hb分子由2条α类肽链和2条β类肽链组成。在正常情况下,99%Hb铁原子Fe2+(还原血红蛋白),1%呈Fe3+(高铁血红蛋白),只有Fe2+状态的Hb才能与氧结合,称为氧合血红蛋白。
血红蛋白的合成受激素调节,①红细胞生成素:可促进δ-氨基-γ酮戊酸生成和铁的利用,从而促进血红素、Hb的合成;②雄激素:能促进δ-氨基-γ酮戊酸合成酶、红细胞生成素的生成。
胚胎早期第一个形成的血红蛋白是HbGowerⅠ。
出生后3个月,HbA(α2β2)占Hb总量95%以上,HbF(α2γ2)占1%以下。出生后HbA2(α2δ2)占Hb总量的2%~3%。
静脉血比毛细血管血低(10~15)%
HiCN法:年被ICSH推荐为参考方法。静脉血比毛细血管血低10%~15%。
13、红细胞稀释液:①Hayem液由NaCl(调节渗透压)、Na2S04(提高比密防止细胞粘连)、HgCl2(防腐)和蒸馏水组成。②枸橼酸钠稀释液由枸橼酸钠(抗凝和维持渗透压)、甲醛(防腐和固定红细胞)、氯化钠(调节渗透压)和蒸馏水组成。
14、发生大细胞性贫血或小细胞低色素性贫血时,红细胞计数与血红蛋白浓度不成比例。大细胞性贫血的血红蛋白浓度相对偏高,小细胞低色素贫血的血红蛋白减低,但红细胞计数可正常。
大量失血时,在补充液体前,虽循环血容量缩小,但血液浓度很少变化,从血红蛋白浓度来看,很难反映出存在贫血。如水潴留时,血浆容量增大,即使红细胞容量正常,但血液浓度减低,从血红蛋白浓度来看,已存在贫血,反之,失水时,血浆容量缩小,即使血液浓度增高,但红细胞容量减少,从血红蛋白浓度来看,贫血不明显。
15、球形红细胞:见于遗传性和获得性球形细胞增多症(如自身免疫溶血性贫血、直接理化损伤如烧伤等)和小儿。
椭圆形红细胞:见于遗传性椭圆形细胞增多症(可达25%~75%)、大细胞性贫血(可达25%)、缺铁性贫血、骨髓纤维化、巨幼细胞贫血、镰形细胞性贫血、正常人(约占1%,不超过15%)。
靶形红细胞:见于各种低色素性贫血(如珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病)、阻塞性*疸、脾切除后。
口形红细胞:见于口形红细胞增多症、小儿消化系统疾患引起的贫血、酒精中*、某些溶血性贫血、肝病和正常人(<4%)。
镰形红细胞:见于镰状细胞贫血(HbS-S,HbS-C)、镰状细胞特性样本(HbA-S)。
棘红细胞:见于遗传性或获得性β-脂蛋白缺乏症(高达70%~80%)、脾切除后、酒精中*性肝病、尿*症。需与皱缩红细胞(锯齿状红细胞)鉴别,皱缩红细胞边缘呈锯齿形,排列紧密,大小相等,外端较尖。
裂红细胞:见于DIC、微血管病性溶血性贫血、重型珠蛋白生成障碍性贫血、巨幼细胞性贫血、严重烧伤和正常人(<2%)。
缗钱状红细胞:(纤维蛋白原、球蛋白增高),见于多发性骨髓瘤。
有核红细胞(幼稚红细胞):1周内婴儿可见少量,如溶血性贫血(如新生儿溶血性贫血、自身免疫性溶血性贫血、巨幼细胞性贫血)、造血系统恶性疾患或骨髓转移性肿瘤(如各种急、慢性白血病、红白血病)、慢性骨髓增生性疾病(如骨髓纤维化)、脾切除后。
新月形红细胞:见于某些溶血性贫血(PNH)。
泪滴形红细胞:见于贫血、骨髓纤维化和正常人。
红细胞形态不整:见于某些感染、严重贫血、巨幼细胞性贫血。
16、点彩红细胞((变性RNA),)增高:见于中*(如铅、汞、银、铋、硝基苯、苯胺等)、各类贫血(如溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、恶性贫血、恶性肿瘤等)。
卡波氏环是胞质中脂蛋白变性所致,常与染色体小体同在,见于巨幼红和铅中*。
豪焦小体:位于成熟或幼稚红胞质内染成紫红色,数量不一的圆形颗粒,是核的残留物,又称染色质小体。
17、血细胞比容测定:将离心管置于水平离心机以g(即有效半径22.5cm,r/min),离心30min。
离心后血液分为5层,自上而下分别为血浆层、血小板层、白细胞层和有核红细胞层、还原红细胞层(紫黑红色)、带氧红细胞层(鲜红色)。
ICSH确定的参考方法是放射性核素法
19、网织红细胞计数(尤其是网织红细胞绝对值)是反映骨髓造血功能的重要指标。当骨髓网织红细胞增多,外周血减少时,提示释放障碍;骨髓和外周血网织红细胞均增加,提示为释放增加。正常时,外周血网织红细胞中Ⅲ型约占20%~30%,Ⅳ型约占70%~80%,若骨髓增生明显,可出现Ⅰ型和Ⅱ型网织红细胞。
网织红细胞活体染色,WH0推荐使用新亚甲蓝染液,染液与血液比例以1:1。网织红细胞计数:ICSH推荐使用Miller窥盘。其精度CV约为10%。
骨髓移植后第21d,如Ret大于15×/L,表示无移植并发症;小于15×/L,伴中性粒细胞和血小板增高,可能为骨髓移植失败。
晚幼红细胞脱核成网织红细胞的过程是在骨髓完成(约需72h)。
LFR,MFR,HMR分别是低,中,高荧光率。
20、血沉:(ICSH推荐魏氏法)小分子蛋白如清蛋白、卵磷脂等使血沉减缓,大分子蛋白如纤维蛋白原、急性反应蛋白、免疫球蛋白、巨球蛋白、胆固醇、甘油三酯等使血沉加快。红细胞直径越大血沉越快,球形红细胞、镰形红细胞使血沉减慢。
室温过高使血沉加快,室温过低使血沉减慢。高胆固醇血症、贫血使血沉轻度增快。遗传性红细胞增多症、镰形细胞性贫血、红细胞异形症等血沉可减慢。血沉管倾斜3°,沉降率增加30%。
慢性炎症(结核病、结缔组织炎症、风湿热)活动期血沉增快,病情好转血沉减慢,非活动期血沉正常。
21、成熟粒细胞(杆状、分叶)贮存于骨髓,在贮备池中停留3~5d,数量为外周血的5~20倍;白细胞计数值是循环池的粒细胞数;中性粒细胞具有趋化、变形、黏附作用以及吞噬、杀菌等功能;单核-巨噬细胞具有吞噬病原体功能(如病*、原虫、真菌:结核杆菌等)、吞噬和清理功能(如组织碎片、衰老血细胞、抗原抗体复合物、凝血因子等)、吞噬抗原传递免疫信息功能,还参与杀菌、免疫和抗肿瘤作用。
中性粒细胞绝对值低于1.5×/L,称为粒细胞减低症,低于0.5×/L时,称为粒细胞缺乏症。
显微镜分类法:是白细胞分类计数参考方法。涂片尾部中性粒细胞较多,淋巴细胞较少,单核细胞沿涂片长轴均匀分布。幼稚细胞分布在涂片尾部和边缘,淋巴细胞、嗜碱性粒细胞分布在涂片头部和体部。
22、正常外周血中性粒细胞以3叶核居多,杆状核与分叶核比值为1:13。
核左移:杆状核超过5%或有幼稚细胞。
再生性左移:指核左移伴有白细胞总数增高者,表示机体反应性强、骨髓造血功能旺盛,见于感染(尤其急性化脓性感染)、急性中*、急性溶血、急性失血等。
轻度左移:白细胞总数及中性粒细胞百分数略增高,仅杆状核粒细胞增多(>5%),表示感染程度较轻,机体抵抗力较强。
中度左移:白细胞总数及中性粒细胞百分数均增高,杆状核粒细胞>10%并有少数晚幼粒细胞和中*性改变,表示有严重感染。
重度左移:白细胞总数及中性粒细胞百分数明显增高,杆状核粒细胞>25%,并出现幼稚的粒细胞。
退行性左移:指核左移而白细胞总数不增高甚至减低者,见于再障、粒细胞减低症、严重感染(如伤寒、败血症等)。
核右移:中性分叶核分叶5叶以上超3%。常伴白细胞总数减低,为造血物质缺乏、脱氧核糖核酸减低、骨髓造血功能减退所致。见于营养性巨幼细胞性贫血、恶性贫血、应用抗代谢药物(如阿糖胞苷、6-巯基嘌呤等)、炎症恢复期。
中性粒细胞*性变化有:大小不一,中*颗粒,空泡,Doles小体,退行性变。
23、儿童外周血单核细胞较成人稍多,平均为9%,出生后2周婴儿可呈生理性单核细胞增多,可达15%或更多,妊娠时生理性增高与中性粒细胞变化相平行。
24、钩虫病嗜酸细胞可达90%以上。嗜酸细胞白血病时亦可明显升高,但以幼稚为主。
35、棒状小体(Auer小体):见于急性白血病,尤其是颗粒增多型早幼粒细胞白血病(M3型)
36、异形淋巴细胞多为T淋巴细胞,分空泡、不规则、幼稚三型。
37、放射线损伤后淋巴细胞形态变化:卫星核淋巴细胞(胞质中主核旁出现小核),即微核。
38、异常形态浆细胞:Mott细胞、火焰状浆细胞、Russell小体。
39、白血病时血小板(MPV)增高是骨髓造血恢复的第一征兆。
白细胞直方图变化的部分原因
白细胞直方图变化主要原因淋巴细胞峰左侧异常有核红细胞、血小板聚集、巨大血小板、未溶解红细胞、疟原虫、冷凝集蛋白、脂类颗粒、异形淋巴细胞淋巴细胞峰右移,与单个核细胞峰左侧相连并抬高急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、异形淋巴细胞单个核细胞峰抬高增宽原始或幼稚细胞、浆细胞、嗜酸性粒细胞增多、嗜碱性粒细胞增多、单核细胞增多单个核细胞峰与中性粒细胞峰之间异常未成熟的中性粒细胞、异常细胞亚群、嗜酸性粒细胞增多中性粒细胞峰右移、抬高、增宽中性粒细胞绝对值增多。
40、网织红细胞成熟指数(RMI)增高:见于溶血性贫血、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、急性白血病、真性红细胞增多症、再生障碍性贫血、多发性骨髓瘤。
RMI减低:提示骨髓衰竭和造血无效,见于巨幼细胞性贫血。
41、ABO遗传基因位于第9号染色体长臂三区四带,脑脊液中无血型物质,抗A与抗B主要是IgM,O型血中以IgG为主。
ABO系统抗体分天然抗体与免疫性抗体:天然抗体以IgM为主,又称完全抗体或盐水抗体;免疫性抗体:有IgM、IgG、IgA,但主要是IgG。
42、新生儿不宜做反向定型。酶介质法作血型鉴定时,用蛋白酶处理红细胞,主要是破坏红细胞表面的唾液酸,使红细胞表面负电荷减少。
43、新生儿溶血的直接实验依据:红细胞直接抗人球蛋白试验阳性。
44、HLA分型的方法主要有:1.淋巴细胞*试验,一类抗原用T或外周淋,二类抗原用B;2.混合淋巴细胞培养试验;3.HLA基因分析。
45、强直性脊椎炎有91%带有HLA-B27抗原而正常人只有6%。
46、血液保存液有:1.ACD(A枸橼酸C枸橼酸三钠D葡萄糖)2.CPD(C枸橼酸三钠P磷酸盐D葡萄糖腺嘌呤枸橼酸)。
47、枸橼酸是防止葡萄糖在消*中焦化,腺嘌呤促进ATP合成延长红细胞寿命,磷酸盐提高PH。
48、尿液防腐剂有:
(1)甲醛——对尿细胞、管型
(2)甲苯:——尿糖、尿蛋白等化学成分的定性或定量检查。
(3)麝香草酚:——用于尿显微镜检查、尿浓缩结核杆菌检查,以及化学成分保存。
(4)浓盐酸——用作定量测定尿17-羟、17-酮、肾上腺素、儿茶酚胺、Ca2+等标本防腐。
(5)冰乙酸——用于检测尿5-羟色胺、醛固酮等的尿防腐。
(6)戊二醛——用于尿沉淀物的固定和防腐。
49、多尿:24h尿总量>ml。少尿:指24h尿量<ml。无尿:指尿量<ml/24h,或<17ml/h。
50、肉眼血尿:每升尿含血量≥1ml。镜下血尿:尿经离心沉淀镜检时发现红细胞数>3/HP。
51、尿三杯试验,如血尿以第一杯为主,多为尿道出血;以第三杯为主,多为膀胱出血;如三杯均有血尿,多见于肾脏或输尿管出血。
52、尿三杯试验也可区分脓尿部位:如脓尿出现于第三杯,提示为膀胱颈炎、膀胱三角区炎症;如三杯均为脓尿(全程脓尿),提示病变位于膀胱颈以上的尿路,见于膀胱炎、输尿管炎、肾盂肾炎、肾脓肿、肾积脓等。
53、乳糜尿:加入等量乙醚或氯仿,苏丹Ⅲ染色阳性。
55、尿渗量主要与尿中溶质颗粒数量、电荷有关,而与颗粒大小关系不大。尿渗量能较好地反映肾脏对溶质和水的相对排出速度,更确切地反映肾脏浓缩和稀释功能,因此是评价肾脏浓缩功能较好的指标。
原尿中不存在的物质是红细胞;原尿中的葡萄糖被完全重吸收的场所是近曲小管;原尿中肌酐几乎不被重吸收而随尿排出体外。
56、晨尿的比密不超过1.,或差值在0.-0.间,或恒定在1.时说明肾浓缩稀释功能已基本消失。
57、低血钾碱中*尿酸性高,高血钾酸中*呈碱性尿,变形杆菌感染呈碱性,肾小管性酸中*时尿PH值不低于6。
58、糖尿病酮症:尿液呈烂苹果味;苯丙酮尿症:尿液呈老鼠屎味。
59、本周蛋白(凝溶蛋白)经乙酸纤维素膜电泳,BJP可在α2至γ球蛋白区带间出现“M”带。多见于多发性骨髓瘤,尿肌红蛋白——多见于骨骼肌严重创伤大面积心梗。
60、选择性蛋白尿指数(SPI)即测定尿及血中IgG或白蛋白的比值来求得,>0.2为选择性差,<0.1为选择性好,尿中白蛋白/球蛋白>5时为选择性蛋白尿。
61、80%饱和硫酸铵可沉淀其它蛋白而不能沉淀肌红蛋白可用来签别。
62、管型的基质蛋白为T—H蛋白。远端肾小管病变定位标志物。
T-H蛋白可沉着于肾间质并刺激机体产生相应的自身抗体
63、颗粒管型——肾脏实质性病变;红细胞管型——肾静脉血栓;肾小管上皮细胞管型为肾移植排异反应的可靠指标之一;
肾上皮细胞管型与白细胞管型鉴别:加酸法呈现细胞核;酯酶染色(+),过氧化物酶染色(-)
64、机体每次进餐后,尿液的pH呈一过性增高,称之为碱潮。
65、蛋白尿:尿液中蛋白质>mg/24h或>mg/L时,蛋白定性试验呈阳性。尿蛋白定量>3.5g/24h时,称为肾病性蛋白尿,最典型的病例是肾病综合征
66、磺基水杨酸法——干化学法检查尿蛋白的参考方法
67、尿PH(甲基红或溴麝香草酚),尿比密(多聚电解质:甲乙烯酸马来酐),尿蛋白(溴酚蓝),尿糖(色原:碘化钾,邻甲联苯胺),尿酮体(亚硝基铁氰化钠),尿胆红素(2,4二氯苯胺重氮盐),尿胆原(二甲氨基甲醛),尿亚硝酸盐(对氨基苯砷酸和四羟基对苯喹啉3酚),尿白细胞(吲哚酚酯),尿血红蛋白(过氧化氢茴香素或过氧化氢烯钴和色原),尿维C(中性红,缓冲剂,二氯酚靛酚钠)。
68、维生素C对尿糖测定的影响:尿液在低葡萄糖浓度(14mmol/L)时,维生素C与试带中的试剂发生竞争性抑制反应,使干化学法产生假阴性反应,而班氏法产生假阳性的结果。
69、胆红素、尿胆原及尿胆素,俗称尿三胆;胆红素、尿胆原,俗称尿二胆;
70、尿β2-M检测主要用于评估肾脏早期损伤时肾小球和近端肾小管功能。
71、hCG是唯一不随胎盘重量增加而分泌增多的胎盘激素,分泌后直接进入母血,几乎不进入胎血循环。产后九天或人流25天后HCG恢复正常,产后四天人流十三天后HCG应小于0,男性尿中HCG增高要考虑睾丸肿瘤。
72、尿N-乙酰β-D-氨基葡萄糖酐酶(NAG)是肾小管功能损害最敏感的指标之一。
73、镜检粪便中脂肪小滴大于6个/HP视为脂肪排泄过多。
74、正常粪便中G+球菌与G-杆菌比值约1:10。
75、隐孢子虫是AIDS和儿童腹泄重要病原诊断,且要查到卵囊。
76、正常空腹十二小时后胃液残余量为50ML。
77、脑脊液抽取时:第一管:细菌学检查,第二管:生化免疫学检查,第三管:细胞计数。
78、脑脊液*变症可分为四种,感染性、*疸性、淤滞性、梗阻性出血性
79、结核性脑膜炎的脑脊液在12~24小时内呈薄膜或纤细的凝块。毛玻璃样浑浊。
80、单纯疱疹脑炎时脑脊液中淋巴样细胞中可发现胞质内包涵体。
81、粒细胞、淋巴细胞、浆细胞同时存在是结核性脑膜炎的特点。
82、蛋白---细胞分离现象(Froin综合症)是蛛网膜下腔梗阻所致梗阻脑脊液的特征。脑脊液同时存在胶样凝固、*变症和蛋白质细胞分离。
83、髓鞘碱性蛋白(MBP)增高见于多发性硬化症。
84、神经性梅*检查首选试验是:密螺旋体荧光抗体吸收试验(FTA—ABC)。
85、浆膜积液(脑脊液)常规及细胞学检查用EDTA抗凝,生化检查用肝素。
86、黏蛋白是一种酸性糖蛋白,其等电点为pH3~5。
87、漏出液以淋巴、间皮细胞为主,渗出液以中性粒、淋巴、嗜酸性细胞为多。
88、关节腔液高度黏稠,其高低与透明质酸的浓度和质量呈正相关。炎性积液的黏稠度减低,关节炎症越严重,积液的黏稠度越低。
89、WH0建议将精子活动力分为4级:①快速前向运动(Ⅲ级:直线运动);②慢或呆滞的前向运动(Ⅱ级:运动缓慢);③非前向运动(Ⅰ级:原地运动);④不动(0级:不活动)。
活动力参考值:WH0规定正常生育者精子活动力:射精后60min内,Ⅲ级精子应>25%;或Ⅲ和Ⅱ级精子的总和>50%。
90、羊水中AFP增高,主要见于开放型神经管畸形。
91、胎儿肺成熟度——羊水泡沫试验(振荡试验)。
92、如果空腹胃液量大于ml,BA0大于15mmol/h,MA0大于30mmol/h,且BA0/MA0大于0.6,即可考虑胃泌素瘤。
93、良性病变的上皮细胞形态:增生、再生、化生。
94、核异质:主要表现为核增大、形态异常、染色质增多、分布不均、核膜增厚、核染色较深,胞质尚正常。核异质细胞是介于良性和恶性之间的过渡型细胞,根据核异质细胞形态改变程度,可分为轻度核异质和重度核异质。
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